표준 준비:
10 mL 부피 측정 플라스크로 정확하게 (±0.01 mg) 각 kavalactone 기준 규격의 대략 10 mg의 무게를 달아 혼합 재고 기준을 준비하십시오. 메탄올의 7.0 mL를 추가하고 녹이는까지 초음파 처리하십시오. 양에 메탄올로 묽게 하고 섞으십시오.
고시: 양자택일으로, kavain 주식 기준을 같은 방식으로 준비하고에 대하여 양을 정하기 위하여 kavalactone 응답 요인을 이용하십시오.
최저 4 점 기준 곡선을 창조하기 위하여 주식 기준을 묽게 하십시오. 주식의 건의한 표준 희석은 메탄올을 사용하여 1:10, 1:25 및 1:100입니다.
고시: 냉장한 온도 (0 - 5°C)에 기준을 저장하십시오. Kavalactones는 48 시간 후에 급속하게 타락합니다. 각 분석의 앞에 신선한 기준 규격의 준비는 추천됩니다.
기구
· ±0.01 mg에 정확한 측정된 분석용 저울
· , 종류 A 부피 측정의 플라스크 분류된 크기
· 작은 유리병, 모자를 가진 착색인쇄기
· USP 장에서 설명된대로 고성능 액체 착색인쇄기 체계. 그 기구, 소프트웨어를 확인하고 문서화하거든, 하부 조직은 임명 자격/가동 자격 (IQ/OQ)를 위한 성능 필요 조건을 만족시킵니다.
· , 0.45 µm, Gelman Acrodisc 나일론 (P/N 4426), Whatman Puradisc™ 폴리프로필렌 (고양이 거르십시오. 아니오 6788-2504), Whatman GD/X 유리 (고양이. 아니오 6894-2504) 또는 동등한 Sonicator
· 란, YMCbasic의 5 µm, 4.6 x 250 mm (고양이. 아니 BA99S05-2546WT). 동등한 란, YMC J'Sphere H80, 4µ, 4.6 x 250 (고양이. 아니 JH08S04-2546WT).
시약
· 물, HPLC 급료 또는 Nanopure
· 메탄올, HPLC 급료
· 아세토니트릴, HPLC 급료
· 인산, ACS 시약 급료
표본 준비:
공장 설비 재료
정확하게 (± 0.1mg) 정밀하게 지상에 놓인 줄기, 껍질을 벗김, 또는 뿌리 물자의 대략 750 mg의 무게를 다십시오.
메탄올/물 (70/30)의 40 mL와 함께 50 mL 부피 측정 플라스크로 물자를 두십시오. 실내 온도에 60 분 동안 초음파 처리하십시오.
플라스크가 실내 온도에 냉각하고 양에 메탄올/물 (70/30)로 묽게 하고 섞는 것을 허용하십시오.
HPLC 작은 유리병 및 모자로 여과기와 장소 표본.
분말과 연약한 추출물 (풀)
정확하게 50 mL 부피 측정 플라스크로 (± 0.1 mg) 추출물의 대략 100 mg의 무게를 다십시오. (100개의 mg 무게는 추출물에 있는 50-60% kavalactone 내용에 근거합니다.) 고시: 주의깊게 간색하기 전에 추출물을 균질화하십시오. 이것은 60°에서 가라앉힌 콘테이너 - 자유로운 흐르기까지 80° C 뜨거운 목욕에 있는 추출물을 두어서 달성됩니다.
메탄올의 40 mL를 추가하고거든 10 분 동안 초음파 처리하십시오 고체 전부까지 녹였습니다.
플라스크가 실내 온도에 냉각하고 양에 메탄올로 묽게 하고 섞는 것을 허용하십시오.
HPLC 작은 유리병 및 모자로 여과기와 장소 표본.
분말 표본
Kava 추출물은 수시로 혼합됩니다 또는 살포 - 각종 운반대에 말립니다. 성공적으로 분말 표본을 분석하기 위하여, 운반대에서 kavalactones를 재기하는 표본 준비 단계를 개발하는 것이 필요합니다. 이것은 순수한 메탄올 또는 물로 첫째로 추출해서 달성될 수 있습니다.
색층 분석 조건:
란: YMCbasic의 5 µm, 4.6 x 250 mm
란 온도: 40°C
흐름율: YMCbasic를 위한 0.6 mL/min; J'Sphere를 위한 1.0 mL/min
이동할 수 있는 단계: isocratic 0.1% 인산: 이소프로필알콜: 아세토니트릴 (64:16: 20 v/v)
탐지: 220 nm (선택성을 개량하는 양자택일의 246 nm)
주입 양: 5 µL
런타임: 30 분
절차:
기준 규격 해결책을 준비하고 지시되는 것과 같이 준비를 간색하십시오.
적출 용매 공백의 단 하나 주입을 만드십시오.
표준 준비의 단 하나 주입을 만드십시오.
표준 피크 넓이의 선형성 작의를 대 표준 농도 창조하십시오.
표본 준비의 단 하나 주입을 만드십시오.
표본에 있는 kavalactone 농도를 산출하십시오.
체계 적부:
선형 역행의 상관계수 ≥0.999이어야 합니다. desmethoxyyangonin와 yangonin 첨단 사이 해결책은 ≥1.8이어야 합니다.
산시 성 Y 나물 생물공학 Co., 주식 회사.